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SW1990細(xì)胞,人胰腺癌細(xì)胞狀態(tài)
產(chǎn)品名稱:SW1990細(xì)胞
中文名稱:人胰腺癌細(xì)胞
來(lái)源:人胰腺腺癌,脾轉(zhuǎn)移灶
類別:類屬于癌細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài):上皮樣
生長(zhǎng)狀態(tài):貼壁生長(zhǎng)
培養(yǎng)基:Leibovitz's L-15(LL-15) 90%, Fetal Bovine Serum 10%
培養(yǎng)條件:37℃,5% CO2
消化條件:0.25% (w/v) Trypsin-0.03%(w/v) EDTA 溶液,消化 5-10min
主營(yíng)細(xì)胞:COLO 205細(xì)胞,TT細(xì)胞,EC9706細(xì)胞,HCAEC細(xì)胞,3D4/21細(xì)胞,MS1細(xì)胞,Sf9細(xì)胞
消化比例:1:2-1:4
換液時(shí)間:2-3 天換液一次
凍存液比例:85%培養(yǎng)基,10%FBS,5% (v/v) DMSO
凍存密度:1-3 ×10^6/管,液氮保存
主營(yíng)細(xì)胞:CNE細(xì)胞,MADB-106細(xì)胞,U266細(xì)胞,HOC細(xì)胞,293XL-hTLR7細(xì)胞,RAW-Blue細(xì)胞
若客戶收到2ml小管SW1990細(xì)胞,人胰腺癌細(xì)胞狀態(tài)
收到細(xì)胞以后,用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作;然后將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶,加入5ml左右含F(xiàn)BS的培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱隔夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞匯合度:若未超過(guò)80%匯合度,換液繼續(xù)培養(yǎng),根據(jù)情況傳代或者凍存。若超過(guò)80%匯合度,可直接進(jìn)行傳代(細(xì)胞貼壁處理方法)。
1、細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。從細(xì)胞資源中心獲得細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作。
2、鏡下觀察:將瓶裝的*培養(yǎng)液移入無(wú)菌瓶中,留待日后培養(yǎng)用,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培養(yǎng)液,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);超過(guò)80%匯合度時(shí),按要求比例消化傳代。(收到細(xì)胞,建議棄去原基培養(yǎng),使用新鮮*培養(yǎng)基培養(yǎng))
3、消化方法:
1、將瓶裝的*培養(yǎng)液移入無(wú)菌瓶中,留待日后培養(yǎng)用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化。(收到細(xì)胞,建議棄去原基培養(yǎng),使用新鮮*培養(yǎng)基培養(yǎng))
2、T25瓶加3ml PBS,洗一次,棄上清,再加1ml消化液消化,顯微鏡下觀察,等細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)后,加培養(yǎng)基混勻,離心收集,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6, 1:6-1:8),每T25瓶加培養(yǎng)基至6-8ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。
慧穎生物購(gòu)買SW1990細(xì)胞,人胰腺癌細(xì)胞狀態(tài)注意事項(xiàng):
1、客戶在收到細(xì)胞時(shí),請(qǐng)首先觀察培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否外滲,培養(yǎng)液是否混濁。如發(fā)現(xiàn)有瓶破、滲漏、培養(yǎng)液混濁等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谑盏郊?xì)胞后立即與我們 王。
2、由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái),顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí),請(qǐng)離心收集,重懸細(xì)胞,置培養(yǎng)箱培養(yǎng),細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如果細(xì)胞仍不能貼壁,請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力。
3、收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況,請(qǐng)按照細(xì)胞處理方法處理細(xì)胞。
SW1990細(xì)胞,人胰腺癌細(xì)胞狀態(tài) 細(xì)胞圖片來(lái)源于:慧穎細(xì)胞室 提供
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