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慧穎細(xì)胞庫 人卵巢癌細(xì)胞系大賣,*,熱賣款*格,種類多,狀態(tài)佳,凡購買我公司任意一株卵巢癌細(xì)胞系,我公司贈送德國SERANA*,優(yōu)等級別20-50ML試用裝一瓶,多買多得,咨詢
TOV21G細(xì)胞*人卵巢癌細(xì)胞系
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慧穎細(xì)胞庫提供的所有細(xì)胞僅供科研使用
原代細(xì)胞的培養(yǎng)是指直接從機(jī)體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進(jìn)行培 養(yǎng);因此,較為嚴(yán)格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng),此時的細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì),如果是正常細(xì)胞,仍然保留二倍體數(shù)。不同的原代細(xì)胞傳代次數(shù)不同,具體需咨詢客服人員或者自行查閱 相關(guān)資料。
細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培 養(yǎng)細(xì)胞。從培養(yǎng)代數(shù)來講,理論上可培養(yǎng)到40-50代。
客戶應(yīng)具有一定細(xì)胞培養(yǎng)知識與經(jīng)驗,并具備基本培養(yǎng)條件(細(xì)胞培養(yǎng)實驗室,無菌操作臺、CO2培養(yǎng)箱,可拍照倒置顯微鏡等),并按說明書要求準(zhǔn)備好相應(yīng)的無菌的培養(yǎng)基、血清、雙抗、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板等。如果因客戶缺少基本培養(yǎng)經(jīng)驗和培養(yǎng)條件而導(dǎo)致細(xì)胞死亡或污染,不在我司售后責(zé)任之內(nèi)。
產(chǎn)品名稱:TOV21G細(xì)胞*人卵巢癌細(xì)胞系
生長狀態(tài):貼壁生長|懸浮生長|半貼壁半懸浮生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣|成纖維樣|圓形|不規(guī)則
培養(yǎng)條件:DMEM|1640|MEM|IMDM+10% FBS
細(xì)胞規(guī)格:5-10×105細(xì)胞量
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
運輸方式:新鮮細(xì)胞或凍存細(xì)胞
質(zhì)控:無支原體、無污染、符合標(biāo)準(zhǔn)
潔凈區(qū),并不是沒有細(xì)菌,而是細(xì)菌的數(shù)量非常少,國家標(biāo)準(zhǔn)100級的潔凈標(biāo)準(zhǔn)是浮游菌數(shù)不得超過5個每立方米,沉降菌數(shù)不得超過1個每培養(yǎng)皿.而國外的標(biāo)準(zhǔn)比我國的還要高一點,要求的數(shù)量更少。在我們的潔凈操作臺里,并不是真正一個細(xì)菌都沒有的,所以在操作的時候還是要盡量利索迅速地完成操作。盡量減少進(jìn)入培養(yǎng)體系細(xì)菌的數(shù)量。 處理細(xì)菌污染的重要原則就是:無限地稀釋細(xì)菌的濃度,無限地減少細(xì)菌的數(shù)量! 1).將污染的培養(yǎng)液倒掉,轉(zhuǎn)燒瓶口,加入10mlPBS,適當(dāng)晃動清洗培養(yǎng)瓶,然后倒掉。轉(zhuǎn)燒瓶口。 2).繼續(xù)加入10mlPBS,同樣方法晃動,清洗培養(yǎng)瓶,然后倒掉。 3).繼續(xù)加入5mlPBS,同樣方法洗瓶,主要是培養(yǎng)面,然后倒掉。 4).重復(fù)步驟3再洗。 5).重復(fù)步驟3再洗。 6).加入3-5ml雙抗,洗瓶,靜置3-5分鐘,然后吸出。 7).加入3ml雙抗,洗瓶,靜置3-5分鐘,然后吸出。 8).再加入5mlPBS洗瓶,然后吸出。 9).加入10ml培養(yǎng)液,加入2ml雙抗,放置培養(yǎng)箱培養(yǎng),5小時之后,倒掉培養(yǎng)基,加入PBS洗瓶兩次,然后加入胰酶消化,吹打后置于離心機(jī)800-1000r/min離心,然后洗一次。置于新的培養(yǎng)瓶里培養(yǎng),培養(yǎng)體系加入2ml雙抗。 10).24h之后,視情況換液,若仍然污染嚴(yán)重,培養(yǎng)基渾濁,重復(fù)以上步驟,若看不到污染物,則繼續(xù)步驟1)、3)、4)、6)、8),然后加入培養(yǎng)液培養(yǎng),培養(yǎng)體系加入2ml雙抗. 11).24h之后,若仍污染嚴(yán)重,可再重復(fù)一次,若還污染只能棄之(不過一般沒有出現(xiàn)這種情況),若鏡下不見污染物,則換液PBS洗瓶,正常培養(yǎng)。 以上是對于細(xì)菌污染(常見為金黃色葡萄球菌和大腸桿菌);若為霉菌或者真菌污染,加入兩性霉素B清洗和培養(yǎng),終濃度一般為2.5μg/ml(在30μg/ml時會有細(xì)胞毒性)。另外也可以選擇在培養(yǎng)基里加3ug/ml的制霉菌素或放線菌素D。其它操作同;若為支原體或者黑膠蟲污染,基本上都是重新弄細(xì)胞了。對于黑膠蟲污染,我們會預(yù)防為主。以上方法主要是針對貼壁生長的細(xì)胞,在操作的過程中,一定要小心操作動作,輕柔緩慢,切忌大動作魯莽。防止細(xì)胞脫落。
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