RPE-J，ATCC細胞株簡介：

產(chǎn)品名稱：RPE-J

來源：美國ATCC

數(shù)量：大量

生長狀態(tài)：貼壁生長

器官來源：眼

細胞形態(tài)：上皮樣

相關(guān)疾?。浩渌膊?/span>

品系：Long-Evans

是否是腫瘤細胞：0

物種來源：大鼠

運輸方式：凍存運輸

庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨

復(fù)蘇周期：10個工作日左右

美國ATCC品牌介紹：美國菌種保藏中心，又稱美國模式菌種收集中心(ATCC)，是位于馬里蘭洲洛克菲勒的一家私營的，非贏利性組織。目前它可以提供各種動植物細胞、標(biāo)準(zhǔn)品、菌株達兩萬多種。ATCC的成立可追溯到1925年，一個科學(xué)委員會認識到科學(xué)研究對于微生物的大量需求而萌發(fā)了創(chuàng)建一個微生物相關(guān)制品供應(yīng)中心的想法?；鄯f生物通過自己的渠道為國內(nèi)科研以及生產(chǎn)用戶提供美國ATCC細胞株、菌株等生物標(biāo)準(zhǔn)品。貨期短，*，不需要客戶填寫詳細資料，幫客戶辦理一切海關(guān)手續(xù)，方便快捷！

RPE-J，ATCC細胞株，細胞培養(yǎng)的過程中，經(jīng)常見到黑色的顆?；蛐『邳c，這種情況是怎么引起的呢？該怎么避免呢？

原因：

黑點，大概有細胞本身帶的，環(huán)境有的，還有人身上帶進細胞間的， 還有就是血清和培養(yǎng)基。

解決辦法：

1、如果小黑點有增殖趨勢，那么就有可能是污染了，需要處理；

2、如果小黑點沒有增殖趨勢，且不影響細胞生長，也不影響實驗的話，則可能

a、是「黑膠蟲」，黑膠蟲究竟是一種生物還是非生物，本身就存在爭議。有人認為是從血清中來的一種原蟲，也有人認為是細菌，或是真菌，也有人認為是血清中的蛋白的結(jié)晶?！负谀z蟲」可寄生于動物細胞，也可以生存于培養(yǎng)基中，依靠細胞和培養(yǎng)基中的營養(yǎng)為生，并隨細胞傳代而傳代?！负谀z蟲」與細胞競爭性生長，開始時對細胞并沒有什么影響，但當(dāng)黑膠蟲的數(shù)量多到一定程度的時候， 細胞生長就會受到影響直至死亡，嚴重影響了科研活動的開展和進行。以前（這個至少是 10 年以前），很多實驗室在養(yǎng)細胞時用國產(chǎn)血清，那時的血清可能質(zhì)量不過關(guān)，有所謂的「黑膠蟲」，但是也沒有明確的鑒定。但是現(xiàn)在的血清，即使國產(chǎn)的，如四季青等稍大點的廠家，產(chǎn)品里這種現(xiàn)象就少見了。

b、是細胞碎片，或血清里德沉淀析出，在做布朗運動。

c、是核糖體，也可能是雜質(zhì)

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，傳代培養(yǎng)

懸浮細胞:

1.懸浮細胞常規(guī)傳代操作為半量換液，分瓶傳代，即取出一半細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；也可根據(jù)細胞密度分多瓶傳代。

2.注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液，待細胞密度達到70-80%時重復(fù)傳代操作或者凍存。

半貼壁半懸浮細胞：

1.若懸浮細胞較多且折光率良好，可離心收集，繼續(xù)培養(yǎng)。

2.若有少量細胞懸浮，也可不用收集，傳代操作按常規(guī)貼壁細胞操作流程處理。

3.若懸浮細胞較多，離心收集，原瓶中貼壁細胞按照常規(guī)規(guī)貼壁細胞操作流程進行消化、終止消化、吹打，并與之前收集的懸浮細胞混懸，分瓶培養(yǎng)。

貼壁細胞:

1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml 含0.25% EDTA的胰酶進行消化（注意把握消化時間，通?？刂圃?~2min）

2.鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小時去掉胰酶，加6~8 ml *培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落、吹散；

3.取出部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液，待細胞密度達到70-80%以后重復(fù)傳代操作或者凍存。

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